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      曠場(chǎng)實(shí)驗OFT test protocol

      曠場(chǎng)實(shí)驗,作為一種廣泛應用于心理學(xué)、神經(jīng)科學(xué)以及藥理學(xué)等領(lǐng)域的研究方法,旨在評估實(shí)驗動(dòng)物在新環(huán)境中的探索行為、焦慮程度以及自主活動(dòng)能力。盡管不同研究團隊在具體實(shí)施上可能有所差異,但曠場(chǎng)實(shí)驗的基本程序和指標參數大體上保持一致。



      基本程序(參考)
      一、實(shí)驗前準備與動(dòng)物適應性處理
      1. 新購入的大/小鼠需進(jìn)行至少7天的適應性喂養,期間實(shí)驗人員每天撫摸動(dòng)物,使其適應環(huán)境、光暗周期及熟悉研究人員。
      2. 在實(shí)驗當天早上,稱(chēng)重并記錄實(shí)驗動(dòng)物的體重。
      二、實(shí)驗轉運與箱體準備
      1. 在測試前一小時(shí),將實(shí)驗動(dòng)物轉運至測試室,以適應新環(huán)境,減少應激。
      2. 調試攝像機高度,確保能完整記錄箱體所有區域。
      3. 實(shí)驗者調試好實(shí)驗參數,記錄實(shí)驗日期、動(dòng)物分組及編號等信息。
      4. 使用75%酒精清潔實(shí)驗箱,確保箱體清潔無(wú)味。


      大小鼠曠場(chǎng)實(shí)驗,XR-XZ301,上海欣軟

      三、實(shí)驗動(dòng)物操作與觀(guān)察
      1. 握住大/小鼠尾巴根部1/3處,輕柔地從飼養籠中取出,注意背向實(shí)驗人員,避免引起動(dòng)物應激。
      2. 將動(dòng)物迅速放置到實(shí)驗箱中央區域,同時(shí)啟動(dòng)視頻采集與分析系統,記錄動(dòng)物在曠場(chǎng)中的活動(dòng)。
      3. 實(shí)驗者迅速撤離至觀(guān)測位置,或離開(kāi)測試室至另一觀(guān)測房間,減少對動(dòng)物的干擾。
      四、實(shí)驗進(jìn)行與數據記錄
      1. 設置實(shí)驗時(shí)間為15分鐘,期間動(dòng)物自由探索、移動(dòng)。
      2. 實(shí)驗結束后,停止錄像并保存數據,將動(dòng)物放回飼養籠中。
      五、實(shí)驗清理與后續處理
      1. 每次測試后,**動(dòng)物排泄物,使用75%酒精去除箱體氣味,待箱體干燥無(wú)味后進(jìn)行下一次實(shí)驗。
      2. 導出實(shí)驗數據進(jìn)行統計分析,為相關(guān)研究提供數據支持。

      參數解析
      一、運動(dòng)參數解析
      1. 水平運動(dòng)總距離:該參數反映了實(shí)驗動(dòng)物的運動(dòng)能力。通過(guò)視頻分析軟件設定合適的運動(dòng)值,我們可以計算出動(dòng)物在實(shí)驗期間的總運動(dòng)距離。當動(dòng)物處于抑郁狀態(tài)時(shí),其運動(dòng)總距離會(huì )明顯縮短,多躲避于曠場(chǎng)角落不動(dòng);而探索欲較強的動(dòng)物則表現為行為活躍,四處走動(dòng)探索,總距離增加。
      2. 靜止時(shí)間:此參數是指動(dòng)物活動(dòng)低于設定運動(dòng)值的時(shí)間。動(dòng)物在靜止時(shí)可能表現為蜷縮、趴著(zhù)或睡覺(jué)。較長(cháng)的靜止時(shí)間可能是焦慮抑郁的表現,或是運動(dòng)能力較差的反映。
      3. 運動(dòng)時(shí)間:該參數反映了動(dòng)物的一般運動(dòng)能力,即動(dòng)物運動(dòng)速度高于設定運動(dòng)值時(shí)的活動(dòng)總時(shí)間。
      4. 平均速度:動(dòng)物在曠場(chǎng)中的平均速度是其運動(dòng)總距離與時(shí)間的比值,同樣可反映其一般運動(dòng)能力??偮烦毯推骄俣缺灰暈榉从硨?shí)驗動(dòng)物自發(fā)活動(dòng)的主要數據。
      5. 水平跨格數:又稱(chēng)水平得分,指動(dòng)物四足均跨入相鄰方格范圍內的次數??绺翊螖档亩嗌僦苯臃从沉藙?dòng)物的自發(fā)活動(dòng)程度及興奮程度,抑郁時(shí)跨格次數會(huì )減少。
      6. 周?chē)鷧^與中央區運動(dòng)時(shí)間:周?chē)鷧^運動(dòng)時(shí)間是指動(dòng)物在曠場(chǎng)邊緣區域活動(dòng)的總時(shí)間,而中央區運動(dòng)時(shí)間則是動(dòng)物在曠場(chǎng)中央區域活動(dòng)的總時(shí)間。嚙齒類(lèi)動(dòng)物通常具有趨觸性,即本能避開(kāi)中央區域,沿著(zhù)邊緣活動(dòng)。因此,焦慮程度較高的動(dòng)物更傾向于在周?chē)鷧^活動(dòng),而焦慮程度較低的動(dòng)物則會(huì )在中央區停留更長(cháng)時(shí)間。


      二、行為參數解析
      1. 直立次數:該參數反映了動(dòng)物的探索行為及對新環(huán)境的好奇程度。直立次數多表明動(dòng)物對環(huán)境好奇,探索欲望強;而抑郁模型鼠通常表現出直立次數顯著(zhù)下降,反映出其對外界環(huán)境的好奇心和探索動(dòng)機降低。
      2. 排便次數:計數糞便粒數,動(dòng)物對陌生環(huán)境的緊張和恐懼會(huì )導致排便增加。在較短的實(shí)驗時(shí)間內,排便次數可以作為反映動(dòng)物焦慮情緒的有效指標;但在長(cháng)時(shí)間實(shí)驗中,其與焦慮情緒的相關(guān)性還需進(jìn)一步研究。
      3. 修飾次數:又稱(chēng)理毛次數,指動(dòng)物對面部、四肢、軀干和生殖器的舔舐或使用爪子清洗和梳理的行為。這一行為通常是對新異環(huán)境產(chǎn)生的應激反應。

      曠場(chǎng)實(shí)驗還可用于學(xué)習記憶分析。通過(guò)計算直立一時(shí)間曲線(xiàn)圖中的直立一時(shí)間曲線(xiàn)下的面積(AUC),我們可以分析實(shí)驗動(dòng)物對環(huán)境的適應能力。這一參數為研究者提供了更**的動(dòng)物行為數據,有助于深入理解動(dòng)物的行為特征和心理狀態(tài)。


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